Что такое ПЦР в реальном времени?

ПЦР (полимеразная цепная реакция) в реальном времени - это новый, усовершенствованный вид ПЦР с использованием метода флуоресценции (свечения).
При помощи данного вида ПЦР определяется количество ДНК, РНК копий в исследуемом материале. Поэтому ПЦР в реальном времени называют также количественным ПЦР анализом.

Преимуществами ПЦР анализа в реальном времени являются:

• высокая точность анализа;
• определение количества фрагментов ДНК в исходном материале;
• минимальный риск получения ложных результатов при анализе;
• высокая специфичность;
• быстрота (результаты готовы в течение часа);
• возможность идентификации нескольких инфекционных агентов одновременно (множественный ПЦР анализ);
• регистрация процесса и результатов в электронном варианте.

ПЦР анализ в реальном времени основан на общих принципах ПЦР. Исследуемый материал помещается в специальный аппарат, называемый амплификатором, и добавляются специальные реактивы и флуоресцентные красители либо специфические флуоресцентные зонды (метки). Под воздействием реагентов фрагменты ДНК, РНК копируются при каждом цикле амплификации. Флуоресцентные красители и зонды прикрепляются к фрагментам, и излучают свечение, которое регистрируется. Интенсивность свечения повышается при увеличении количества копий ДНК, РНК. При помощи флуоресцентного детектора и компьютера результаты регистрируются и визуализируются на экране.

Материалом для исследования могут служить различные биологические жидкости и ткани организма:

• кровь, сыворотка, плазма;
• моча;
• кал;
• мокрота;
• соскобы эпителия (из матки, уретры);
• жидкости организма (спинномозговая жидкость, слюна, суставная и плевральная жидкость, сперма).

ПЦР в реальном времени чаще применяется в медицине при диагностике различных инфекционных болезней

• для определения вирусной нагрузки (количества вирусных агентов);
• для выявления уровня бактериального заражения – бактериальная нагрузка;
• для определения количества внутриклеточных возбудителей инфекций;
• для оценки эффективности лечения;
• для анализа прогноза эффективности лечения;
• для определения устойчивости к лекарственным средствам.